Հիմնական ներածություն
Էրիտրոցիտների լիզատը արյան կարմիր բջիջները հեռացնելու ամենապարզ և հեշտ մեթոդներից մեկն է, այսինքն՝ կարմիր արյան բջիջները լիզատով բաժանել, որը չի վնասում միջուկային բջիջները և կարող է ամբողջությամբ հեռացնել կարմիր արյան բջիջները: Լիզատի բաժանումը արյան կարմիր բջիջների հեռացման մեղմ մեթոդ է, որը հիմնականում օգտագործվում է ֆերմենտային մարսողության միջոցով ցրված հյուսվածքային բջիջների բաժանման և մաքրման, լիմֆոցիտների բաժանման և մաքրման, ինչպես նաև արյան կարմիր բջիջների հեռացման համար՝ հյուսվածքային սպիտակուցների և նուկլեինների փորձերում: թթվային արդյունահանում. Կարմիր արյան բջիջների լիզատով ստացված հյուսվածքային բջիջները չեն պարունակում արյան կարմիր բջիջներ և կարող են հետագայում օգտագործվել առաջնային կուլտուրայի, բջիջների միաձուլման, հոսքի ցիտոմետրիայի, նուկլեինաթթվի և սպիտակուցի տարանջատման և արդյունահանման համար և այլն:
Օգտագործման հրահանգներ
Հյուսվածքային բջիջների նմուշ
1. Թարմ հյուսվածքները մարսվել են ենթաստամոքսային գեղձի/ֆերմենտի կամ կոլագենազի միջոցով և ցրվել են մեկ բջջային կախույթի մեջ, իսկ վերին նյութը հեռացվել է ցենտրիֆուգման միջոցով:
2. Վերցրեք ELS լիզատը սառնարանից 4 ջերմաստիճանում, ELS լիզատը ավելացրեք բջիջների նստվածքին 1:3-5 հարաբերակցությամբ (ավելացրեք 3-5 մլ լիզատ 1 մլ սեղմված բջջի վրա), նրբորեն փչեք և խառնեք:
3. Ցենտրիֆուգեք 800-1000 պտույտ/րոպե արագությամբ 5-8 րոպե և թափեք վերին կարմիր թափանցիկ հեղուկը:
4. Նստեցված մասը հավաքվել և ցենտրիֆուգվել է Հենքի լուծույթով կամ առանց շիճուկի կուլտուրայի լուծույթով 2-3 անգամ:
5, եթե ճեղքը ամբողջական/ավարտված չէ, կարելի է կրկնել 2-րդ և 3-րդ քայլերը:
6. Հետագա փորձերի համար վերականգնողական բջիջներ; Եթե ՌՆԹ-ն արդյունահանվում է, ավելի լավ է դա անել 4-րդ քայլից պատրաստված լուծույթում՝ օգտագործելով DEPC ջուր
Արյան կարմիր բջիջներն ունեն շատ կարճ կյանքի ցիկլ՝ ընդամենը 120 օր, բայց նրանք շատ արագ են վերարտադրում արյունը, և այս դեպքում նրանք հատկապես ունակ են բջիջների բաժանման, և դրանք բոլորից ամենաարագ բաժանվող բջիջներն են, ուստի այս բջիջը շատ արժեքավոր է։ ուստի այն շատ օգտակար է բջիջների կուլտուրայի համար: Դա շատ պարզ է, այն չունի օրգանելներ, միայն բջջային թաղանթներ և սպիտակուցներ: