տուն > Բլոգ > Արդյունաբերության նորություններ

Որո՞նք են ELISA հավաքածուի գործառույթները:

2022-12-23

ELISA փաթեթը հիմնված է անտիգենի կամ հակամարմինների պինդ փուլի և անտիգենի կամ հակամարմինների ֆերմենտային պիտակավորման վրա: Հակագենը կամ հակամարմինը, որը կապված է պինդ կրիչի մակերեսին, դեռ պահպանում է իր իմունոլոգիական ակտիվությունը, իսկ ֆերմենտի պիտակավորված հակագենը կամ հակամարմինը պահպանում է և՛ իր իմունոլոգիական ակտիվությունը, և՛ ֆերմենտային ակտիվությունը: Որոշման պահին փորձարկվող նմուշը (որում չափվում է հակամարմինը կամ անտիգենը) արձագանքում է պինդ կրիչի մակերեսի վրա գտնվող անտիգենի կամ հակամարմինի հետ։ Պինդ կրիչի վրա առաջացած հակագեն-հակամարմին համալիրը լվացման միջոցով առանձնացվում է հեղուկի այլ նյութերից։

Ավելացվում են ֆերմենտներով պիտակավորված անտիգեններ կամ հակամարմիններ, որոնք նույնպես կապվում են պինդ կրիչի հետ ռեակցիայի միջոցով։ Այս պահին պինդ փուլում ֆերմենտի քանակը համաչափ է նմուշի նյութի քանակին: Ֆերմենտային ռեակցիայի սուբստրատը ավելացնելուց հետո սուբստրատը կատալիզացվում է ֆերմենտի կողմից՝ դառնալով գունավոր արտադրանք: Արտադրանքի քանակությունը ուղղակիորեն կապված է նմուշում փորձարկվող նյութի քանակի հետ, ուստի որակական կամ քանակական վերլուծություն կարող է իրականացվել ըստ գույնի խորության:

Ֆերմենտների բարձր կատալիտիկ արդյունավետությունը անուղղակիորեն ուժեղացնում է իմունային պատասխանի արդյունքները՝ դարձնելով վերլուծությունը խիստ զգայուն: ELISA-ն կարող է օգտագործվել անտիգենները որոշելու համար, բայց կարող է օգտագործվել նաև հակամարմինները որոշելու համար:

ELISA հավաքածուի հիմնական սկզբունքները
Այն օգտագործում է հակագենի և հակամարմինների հատուկ ռեակցիա՝ օբյեկտը ֆերմենտին միացնելու համար, այնուհետև առաջացնում է գունային ռեակցիա ֆերմենտի և սուբստրատի միջև՝ քանակական որոշման համար: Չափման առարկան կարող է լինել հակամարմին կամ անտիգեն:

Որոշման այս մեթոդում անհրաժեշտ են երեք ռեակտիվներ.
  Պինդ փուլի անտիգեն կամ հակամարմին (իմունային կլանիչ)
â¡ ֆերմենտով պիտակավորված հակագեն կամ հակամարմին (մարկեր)
¢ սուբստրատ ֆերմենտային գործողության համար (գունային զարգացման միջոց)

Չափման ժամանակ անտիգենը (հակամարմինը) նախ կապված է պինդ կրիչի հետ, բայց դեռ պահպանում է իր իմունային ակտիվությունը, այնուհետև ավելացվում է հակամարմինի (հակագենի) և ֆերմենտի կոնյուգատ (մարկեր), որը դեռ պահպանում է իր սկզբնական իմունային ակտիվությունն ու ֆերմենտը։ գործունեություն։ Երբ կոնյուգատը փոխազդում է պինդ կրիչի վրա գտնվող անտիգենի (հակամարմին) հետ, ավելացվում է ֆերմենտի համապատասխան սուբստրատը։ Այսինքն՝ կատալիտիկ հիդրոլիզ կամ REDOX ռեակցիա և գույն։

Նրա ստացած գույնի երանգը համաչափ է չափվող հակագենի (հակամարմին) քանակին: Այս գունավոր արտադրանքը կարելի է դիտարկել անզեն աչքով, օպտիկական մանրադիտակով, էլեկտրոնային մանրադիտակով, կարող է նաև չափվել սպեկտրոֆոտոմետրով (ֆերմենտային պիտակի գործիք): Մեթոդը պարզ է, հարմար, արագ և կոնկրետ։

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept