- English
- 简体中文
- Esperanto
- Afrikaans
- Català
- שפה עברית
- Cymraeg
- Galego
- 繁体中文
- Latviešu
- icelandic
- ייִדיש
- беларускі
- Hrvatski
- Kreyòl ayisyen
- Shqiptar
- Malti
- lugha ya Kiswahili
- አማርኛ
- Bosanski
- Frysk
- ភាសាខ្មែរ
- ქართული
- ગુજરાતી
- Hausa
- Кыргыз тили
- ಕನ್ನಡ
- Corsa
- Kurdî
- മലയാളം
- Maori
- Монгол хэл
- Hmong
- IsiXhosa
- Zulu
- Punjabi
- پښتو
- Chichewa
- Samoa
- Sesotho
- සිංහල
- Gàidhlig
- Cebuano
- Somali
- Тоҷикӣ
- O'zbek
- Hawaiian
- سنڌي
- Shinra
- Հայերեն
- Igbo
- Sundanese
- Lëtzebuergesch
- Malagasy
- Yoruba
- Español
- Português
- русский
- Français
- 日本語
- Deutsch
- tiếng Việt
- Italiano
- Nederlands
- ภาษาไทย
- Polski
- 한국어
- Svenska
- magyar
- Malay
- বাংলা ভাষার
- Dansk
- Suomi
- हिन्दी
- Pilipino
- Türkçe
- Gaeilge
- العربية
- Indonesia
- Norsk
- تمل
- český
- ελληνικά
- український
- Javanese
- فارسی
- தமிழ்
- తెలుగు
- नेपाली
- Burmese
- български
- ລາວ
- Latine
- Қазақша
- Euskal
- Azərbaycan
- Slovenský jazyk
- Македонски
- Lietuvos
- Eesti Keel
- Română
- Slovenski
- मराठी
- Srpski језик
Որո՞նք են ELISA հավաքածուի գործառույթները:
2022-12-23
ELISA փաթեթը հիմնված է անտիգենի կամ հակամարմինների պինդ փուլի և անտիգենի կամ հակամարմինների ֆերմենտային պիտակավորման վրա: Հակագենը կամ հակամարմինը, որը կապված է պինդ կրիչի մակերեսին, դեռ պահպանում է իր իմունոլոգիական ակտիվությունը, իսկ ֆերմենտի պիտակավորված հակագենը կամ հակամարմինը պահպանում է և՛ իր իմունոլոգիական ակտիվությունը, և՛ ֆերմենտային ակտիվությունը: Որոշման պահին փորձարկվող նմուշը (որում չափվում է հակամարմինը կամ անտիգենը) արձագանքում է պինդ կրիչի մակերեսի վրա գտնվող անտիգենի կամ հակամարմինի հետ։ Պինդ կրիչի վրա առաջացած հակագեն-հակամարմին համալիրը լվացման միջոցով առանձնացվում է հեղուկի այլ նյութերից։
Ավելացվում են ֆերմենտներով պիտակավորված անտիգեններ կամ հակամարմիններ, որոնք նույնպես կապվում են պինդ կրիչի հետ ռեակցիայի միջոցով։ Այս պահին պինդ փուլում ֆերմենտի քանակը համաչափ է նմուշի նյութի քանակին: Ֆերմենտային ռեակցիայի սուբստրատը ավելացնելուց հետո սուբստրատը կատալիզացվում է ֆերմենտի կողմից՝ դառնալով գունավոր արտադրանք: Արտադրանքի քանակությունը ուղղակիորեն կապված է նմուշում փորձարկվող նյութի քանակի հետ, ուստի որակական կամ քանակական վերլուծություն կարող է իրականացվել ըստ գույնի խորության:
Ֆերմենտների բարձր կատալիտիկ արդյունավետությունը անուղղակիորեն ուժեղացնում է իմունային պատասխանի արդյունքները՝ դարձնելով վերլուծությունը խիստ զգայուն: ELISA-ն կարող է օգտագործվել անտիգենները որոշելու համար, բայց կարող է օգտագործվել նաև հակամարմինները որոշելու համար:
ELISA հավաքածուի հիմնական սկզբունքները
Այն օգտագործում է հակագենի և հակամարմինների հատուկ ռեակցիա՝ օբյեկտը ֆերմենտին միացնելու համար, այնուհետև առաջացնում է գունային ռեակցիա ֆերմենտի և սուբստրատի միջև՝ քանակական որոշման համար: Չափման առարկան կարող է լինել հակամարմին կամ անտիգեն:
Որոշման այս մեթոդում անհրաժեշտ են երեք ռեակտիվներ.
Պինդ փուլի անտիգեն կամ հակամարմին (իմունային կլանիչ)
â¡ ֆերմենտով պիտակավորված հակագեն կամ հակամարմին (մարկեր)
¢ սուբստրատ ֆերմենտային գործողության համար (գունային զարգացման միջոց)
Չափման ժամանակ անտիգենը (հակամարմինը) նախ կապված է պինդ կրիչի հետ, բայց դեռ պահպանում է իր իմունային ակտիվությունը, այնուհետև ավելացվում է հակամարմինի (հակագենի) և ֆերմենտի կոնյուգատ (մարկեր), որը դեռ պահպանում է իր սկզբնական իմունային ակտիվությունն ու ֆերմենտը։ գործունեություն։ Երբ կոնյուգատը փոխազդում է պինդ կրիչի վրա գտնվող անտիգենի (հակամարմին) հետ, ավելացվում է ֆերմենտի համապատասխան սուբստրատը։ Այսինքն՝ կատալիտիկ հիդրոլիզ կամ REDOX ռեակցիա և գույն։
Ավելացվում են ֆերմենտներով պիտակավորված անտիգեններ կամ հակամարմիններ, որոնք նույնպես կապվում են պինդ կրիչի հետ ռեակցիայի միջոցով։ Այս պահին պինդ փուլում ֆերմենտի քանակը համաչափ է նմուշի նյութի քանակին: Ֆերմենտային ռեակցիայի սուբստրատը ավելացնելուց հետո սուբստրատը կատալիզացվում է ֆերմենտի կողմից՝ դառնալով գունավոր արտադրանք: Արտադրանքի քանակությունը ուղղակիորեն կապված է նմուշում փորձարկվող նյութի քանակի հետ, ուստի որակական կամ քանակական վերլուծություն կարող է իրականացվել ըստ գույնի խորության:
Ֆերմենտների բարձր կատալիտիկ արդյունավետությունը անուղղակիորեն ուժեղացնում է իմունային պատասխանի արդյունքները՝ դարձնելով վերլուծությունը խիստ զգայուն: ELISA-ն կարող է օգտագործվել անտիգենները որոշելու համար, բայց կարող է օգտագործվել նաև հակամարմինները որոշելու համար:
ELISA հավաքածուի հիմնական սկզբունքները
Այն օգտագործում է հակագենի և հակամարմինների հատուկ ռեակցիա՝ օբյեկտը ֆերմենտին միացնելու համար, այնուհետև առաջացնում է գունային ռեակցիա ֆերմենտի և սուբստրատի միջև՝ քանակական որոշման համար: Չափման առարկան կարող է լինել հակամարմին կամ անտիգեն:
Որոշման այս մեթոդում անհրաժեշտ են երեք ռեակտիվներ.
Պինդ փուլի անտիգեն կամ հակամարմին (իմունային կլանիչ)
â¡ ֆերմենտով պիտակավորված հակագեն կամ հակամարմին (մարկեր)
¢ սուբստրատ ֆերմենտային գործողության համար (գունային զարգացման միջոց)
Չափման ժամանակ անտիգենը (հակամարմինը) նախ կապված է պինդ կրիչի հետ, բայց դեռ պահպանում է իր իմունային ակտիվությունը, այնուհետև ավելացվում է հակամարմինի (հակագենի) և ֆերմենտի կոնյուգատ (մարկեր), որը դեռ պահպանում է իր սկզբնական իմունային ակտիվությունն ու ֆերմենտը։ գործունեություն։ Երբ կոնյուգատը փոխազդում է պինդ կրիչի վրա գտնվող անտիգենի (հակամարմին) հետ, ավելացվում է ֆերմենտի համապատասխան սուբստրատը։ Այսինքն՝ կատալիտիկ հիդրոլիզ կամ REDOX ռեակցիա և գույն։
Նրա ստացած գույնի երանգը համաչափ է չափվող հակագենի (հակամարմին) քանակին: Այս գունավոր արտադրանքը կարելի է դիտարկել անզեն աչքով, օպտիկական մանրադիտակով, էլեկտրոնային մանրադիտակով, կարող է նաև չափվել սպեկտրոֆոտոմետրով (ֆերմենտային պիտակի գործիք): Մեթոդը պարզ է, հարմար, արագ և կոնկրետ։
