Բջիջների օպտիմալ աճի և փորձարարական արդյունքների ապահովման համար շատ կարևոր է մշակութային արտադրանքի ճիշտ ընտրությունը: Բջջային կուլտուրայի անոթներ ընտրելիս կարևոր է հաշվի առնել այնպիսի գործոններ, ինչպիսիք են բջիջի տեսակը, ձեր կուլտուրայի հատուկ նպատակը, կուլտուրայի մասշտաբը, կուլտուրայի տեսակը, անոթների նյութերն ու չափերը, մակերեսային մշակումները, կափարիչները պատշաճ կերպով: գազի փոխանակում և դրանց համատեղելիությունը ձեր լաբորատոր սարքավորումների հետ:
Ահա հիմնական գործոնները, որոնք պետք է հաշվի առնել բջիջների կուլտուրայի ճիշտ անոթ ընտրելիս
1. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ ելնելով բջիջների տեսակից
Կպչուն բջիջներ
Այս բջիջները մակերեսի կարիք ունեն՝ ամրացնելու և տարածվելու համար: Կպչուն բջիջների համար ձեզ հարկավոր են անոթներ մակերեսով, որը բավականաչափ տարածություն է ապահովում բջիջների ամրացման և աճի համար:
Օրինակներ Հյուսվածքային կուլտուրայով մշակված կոլբայներ, պետրի ափսեներ և բազմաբնակարան ափսեներ:
Կասեցման բջիջներ
Այս բջիջները աճում են լողացող միջավայրում, ուստի մակերեսը հաշվի չի առնվում:
2. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ ելնելով չափից (ծավալային հզորությունից)
Փոքր մասշտաբի մշակույթներ
Փոքրամասշտաբ փորձերի կամ բարձր թողունակության զննման համար ավելի փոքր անոթները իդեալական են:
Օրինակներ Բազմափոր թիթեղներ (6, 24, 96 բջջային կուլտուրայի թիթեղներ),
Պետրիի ուտեստներ, կամ T25 տափաշիշ:
Լայնածավալ մշակույթներ
Եթե Ձեզ անհրաժեշտ է մեծ քանակությամբ բջիջներ աճեցնել, ավելի լավ են ավելի մեծ անոթները կամ կենսառեակտորները:
Օրինակներ T75 և T175 բջջային կուլտուրաների կոլբայի, կենսառեակտորների կամ պտտվող կոլբայի կախովի բջիջների կուլտուրաների համար:
3. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ հիմք ընդունելով մակերեսային մշակումը
Հյուսվածքային մշակույթով մշակված մակերեսներ
Անոթները նախապես մշակվում են բջիջների կցումը խթանելու համար՝ դրանք դարձնելով համապատասխան բջիջների տեսակների համար: Դրանք հիմնականում պատված են այնպիսի նյութերով, ինչպիսիք են կոլագենը, ֆիբրոնեկտինը կամ այլ արտաբջջային մատրիցային բաղադրիչներ:
Չմշակված մակերեսներ
Իդեալական է կախովի մշակույթների համար կամ երբ բջիջները մակերեսին կպչելու կարիք չունեն: Դրանք սովորաբար օգտագործվում են միջավայրում ազատ աճող բջիջների համար:
4. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը նյութի հիման վրա
Պոլիստիրոլը սովորաբար օգտագործվում է ստանդարտ բջջային կուլտուրայի համար: Այն պարզ է, ինչը թույլ է տալիս հեշտ տեսողական ստուգում և լավ է աշխատում ինչպես կպչուն, այնպես էլ կախովի բջիջների համար:
Պոլիկարբոնատը կամ Պոլիպրոպիլենը օգտագործվում են որոշակի բիոռեակտորների կիրառման և անոթների համար, որոնք պահանջում են ավելի ճկունություն կամ մակերեսային հատուկ մշակումներ:
Ստանդարտ հյուսվածքների կուլտուրայի համար օգտագործվող ապակին ծախսերի և կոտրվելու պատճառով, ապակե անոթները կարող են հարմար լինել հատուկ կիրառությունների կամ լայնածավալ մշակույթների համար:
Կոլբաներ
Ընդհանուր բջջային կուլտուրայի համար սովորաբար օգտագործվում են T- flasks (T25, T75, T150): Հարթ մակերեսը լավ տարածք է ապահովում բջիջների ամրացման և աճի համար: Դրանք կարող են օգտագործվել ինչպես կպչուն բջիջների, այնպես էլ կասեցման կուլտուրաների համար, եթե պահպանվեն համապատասխան պայմանները:
Petri ուտեստներ
Տարածված է փոքրածավալ մշակույթների և փորձերի համար, որոնք պահանջում են դիտարկումներ, ինչպիսիք են գաղութների ձևավորման փորձարկումները:
Multi-Well ափսեներ
Սրանք օգտակար են բարձր թողունակության զննման և ավելի փոքրամասշտաբ փորձերի համար: Թիթեղներ 6, 12, 24, 48,
96, կամ 384 հորեր հասանելի են, և իդեալական են բջիջների վրա հիմնված վերլուծությունների, ցիտոկինների արտազատման, դեղերի փորձարկման և բարձր թողունակության այլ ծրագրերի համար:
Spinner Flasks
Օգտագործվում է կախովի բջիջների կուլտուրաների համար, հատկապես ավելի մեծ ծավալներով, որտեղ վերահսկվող հուզումն անհրաժեշտ է բջիջների աճը պահպանելու և բջիջների կուտակումից խուսափելու համար:
Բիոռեակտորներ
Լայնածավալ կասեցման կուլտուրայի համար կենսառեակտորները թույլ են տալիս ավելի բարդ վերահսկել շրջակա միջավայրի պայմանները (օրինակ՝ pH, ջերմաստիճան, թթվածնացում) և օգտագործվում են մեծ ծավալների արտադրության համար, օրինակ՝ կենսադեղագործական արտադրության մեջ:
6. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ հիմնվելով ստերիլության և օդափոխության վրա
Ստերիլություն
Համոզվեք, որ անոթը ստերիլ է կամ ստերիլիզացված է՝ աղտոտումից խուսափելու համար: Առևտրային կուլտուրայի անոթների մեծ մասը նախապես ստերիլիզացված է, բայց միշտ ստուգեք փաթեթավորումը:
Օդափոխում
Որոշ անոթներ, ինչպիսիք են տափաշիշները, ունեն օդափոխվող կափարիչներ կամ ֆիլտրեր, որոնք թույլ են տալիս օդափոխել՝ միաժամանակ կանխելով աղտոտումը: Սա էական նշանակություն ունի բարձր խտության պայմաններում բջիջների մշակման ժամանակ:
7. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ ելնելով օգտագործման հարմարությունից
Autoclavable ընդդեմ միանգամյա օգտագործման
Որոշ կուլտուրայի անոթներ կարող են ավտոկլավացվել՝ կրկնակի օգտագործման համար (օրինակ՝ ապակյա շշեր, որոշակի պլաստիկ կոլբայներ), մինչդեռ մյուսները մեկանգամյա օգտագործման և մեկանգամյա օգտագործման են (օրինակ՝ պլաստմասե Պետրի ամանեղեն, բազմահոր ափսեներ):
բեռնաթափում և փոխադրում
Հաշվի առեք անոթների միջև բջիջների տեղափոխման հեշտությունը: Օրինակ, բազմաբնակարանային թիթեղները կարող են պահանջել մասնագիտացված թիթեղներ՝ սարքավորումների հետ հեշտ աշխատելու համար, ինչպիսիք են ավտոմատացված խողովակաշարերը:
8. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ ելնելով կուլտուրայի միջավայրի ծավալից
Ընտրեք անոթ, որը կարող է տեղավորել մշակութային միջավայրի ցանկալի ծավալը՝ առանց ռեսուրսների վատնման: Եթե աշխատում եք մեծածավալ կուլտուրայի հետ, կարող են անհրաժեշտ լինել ավելի մեծ կոլբաներ կամ կենսառեակտորներ, մինչդեռ ավելի փոքր ծավալները հարմար են բջիջների կուլտուրայի սպասքի կամ թիթեղների համար:
9. Ընտրեք բջիջների կուլտուրայի անոթը՝ հաշվի առնելով ծախսերը
Միանգամյա օգտագործման ընդդեմ բազմակի օգտագործման
Մեկանգամյա օգտագործման պլաստիկ անոթները ծախսարդյունավետ են և նվազեցնում են աղտոտման վտանգը, սակայն դրանք կարող են թանկ արժենալ լայնածավալ գործառնությունների համար: Բազմիցս օգտագործվող ապակե տարաներն ավելի բարձր նախնական արժեք ունեն, սակայն կարող են ստերիլիզացվել և բազմիցս օգտագործվել՝ դրանք ավելի խնայող դարձնելով երկարաժամկետ օգտագործման համար:
Ծավալի արդյունավետություն
Համոզվեք, որ նավի չափը համապատասխանում է նյութերի վատնումից խուսափելու համար, հատկապես թանկարժեք աճի կրիչներ կամ ռեակտիվներ օգտագործելիս:
10. Ընտրեք բջջային կուլտուրայի անոթը՝ ելնելով կիրառման հատուկ պահանջներից
Պատկերում
Եթե Ձեզ անհրաժեշտ է բջիջները մանրադիտակի տակ պատկերացնել, ընտրեք անոթներ՝ օպտիկապես մաքուր նյութերով և համապատասխան չափսերով ձեր պատկերազարդման համար (օրինակ՝ բազմաբնակարան ափսեներ՝ բարձր պարունակությամբ զննման համար կամ ապակե հատակով ափսեներ կենդանի բջիջների պատկերման համար):
Վերահսկվող գրգռում
Կախովի բջիջների կուլտուրաների համար հաշվի առեք պտտվող կոլբաներ կամ կենսառեակտորներ, որոնք ապահովում են վերահսկվող ակտիվացում՝ բջիջները հավասարապես կախված վիճակում պահելու համար:
Եզրակացություն
Բջջային կուլտուրայի ճիշտ անոթ ընտրելը պահանջում է մի քանի գործոնների հավասարակշռում, ներառյալ բջիջի տեսակը, կուլտուրայի մասշտաբը, նյութի համատեղելիությունը և հատուկ փորձարարական կարիքները: Կպչուն բջիջները կպահանջեն մակերեսներ, որոնք նպաստում են ամրացմանը, մինչդեռ կախովի բջիջները օգտվում են ավելի մեծ ծավալներից և հուզմունքից: Փոքրամասշտաբ աշխատանքի համար կարող են բավարար լինել բազմահորով թիթեղները կամ T-կոլբաները, մինչդեռ ավելի մեծ կուլտուրաները կարող են պահանջել պտտվող կոլբաներ կամ կենսառեակտորներ: Միշտ համոզվեք, որ անոթները համապատասխանում են ձեր անպտղության և բեռնաթափման պահանջներին, և հաշվի առեք ծախսարդյունավետությունը՝ հիմնված ձեր օգտագործման վրա:
Հաշվի առնելով այս գործոնները՝ դուք կարող եք ընտրել օպտիմալ անոթ, որն ապահովում է ճիշտ պայմաններ ձեր բջիջների մշակույթի և փորձարարական նպատակների համար: