«Ինչպես բոլորս գիտենք, ՊՇՌ-ն բազային փորձարարական մեթոդ է կենսաքիմիական լաբորատորիաներում»։ Փորձարարական արդյունքները միշտ անբավարար են, ինչը կարող է պայմանավորված լինել PCR պլաստիկ ծախսվող նյութերի աննշան աղտոտվածությամբ կամ ինհիբիտորների ներդրմամբ առաջացած փորձարարական միջամտությամբ: Կա ևս մեկ շատ կարևոր պատճառ՝ սպառվող նյութերի ոչ ճիշտ ընտրությունը նույնպես մեծ ազդեցություն կունենա փորձարարական արդյունքների վրա։
Կան բազմաթիվ պատճառներ, որոնք ազդում են PCR փորձերի արդյունքների վրա. սովորաբար կան հետևյալ 7 տեսակները.
1. Այբբենարաններ. Պրայմերները PCR-ի հատուկ ռեակցիայի բանալին են, և PCR արտադրանքի առանձնահատկությունը կախված է պրայմերների և կաղապարի ԴՆԹ-ի միջև փոխլրացման աստիճանից;
2. Ֆերմենտ և դրա կոնցենտրացիան;
3. dNTP-ի որակը և կոնցենտրացիան;
4. Կաղապար (թիրախային գեն) նուկլեինաթթու;
5. Mg2+ կոնցենտրացիան;
6. Ջերմաստիճանի և ժամանակի կարգավորում;
7. Ցիկլերի քանակը;
8. Սարքավորումներ, սպառվող նյութեր և այլն:
Բազմաթիվ ազդող գործոնների շարքում սպառվող նյութերը շատ կարևոր և հեշտությամբ անտեսվող գործոններից են:
Կան բազմաթիվ տեսակներ
PCR ծախսվող նյութեր8-խողովակներ, ցածր ծավալային խողովակներ, ստանդարտ խողովակներ, առանց եզրագծերով, կիսաշրջազգեստով, լրիվ փեշով և մի շարք PCR և qPCR թիթեղներ: Ընտրելը շատ դժվար է, և կան շատ ընդհանուր խնդիրներ, եկեք նայենք այն խնդիրներին, որոնք ընտրում են յուրաքանչյուրը
PCR ծախսվող նյութեր, և ինչպե՞ս լուծել դրանք։
Ինչու են
PCR ծախսվող նյութերընդհանրապես պատրաստված PP-ից:
Պատասխան. PCR/qPCR ծախսվող նյութերը հիմնականում պատրաստված են պոլիպրոպիլենից (PP), քանի որ այն կենսաբանորեն իներտ նյութ է, մակերեսը հեշտ չէ կպչել բիոմոլեկուլներին և ունի լավ քիմիական դիմադրություն և ջերմաստիճանի հանդուրժողականություն (կարելի է ավտոկլավացնել 121 աստիճանում) բակտերիաներ։ և կարող է նաև դիմակայել ջերմաստիճանի փոփոխություններին ջերմային ցիկլի ընթացքում): Այս նյութերը սովորաբար անմիջական շփման մեջ են ռեակտիվների կամ նմուշների հետ, ուստի արտադրության և պատրաստման գործընթացում անհրաժեշտ է ընտրել բարձրորակ նյութեր և մշակման լավ տեխնիկա: